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笨笨的2003

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(1)在国内率先攻克家畜胚胎分割、冻胚分割技术难关,其成功率达到国际先进水平。(2)系统阐明家畜半胚的冷冻生物学特性,创立了一整套家畜半胚冷冻技术,获得首批不同日龄的同胚双生羔羊。(3)建立了一整套山羊和牛卵母细胞体外成熟和体外受精技术,使体外受精胚的囊胚体外发育率稳定在60%左右。(4)攻克山羊小腔卵泡卵母体外成熟和体外受精难关,使体外成熟率和体外受精胚的卵裂率分别稳定在85%和65%以上。(5)揭示了山羊和牛卵母细胞与颗粒细胞的互作规律和卵母细胞发生、发育和成熟分子调控规律,阐明了c-mos, cdc25, Wee1 3种原癌基因和EGF、MIS、NTF-α和bFGF四种生长因子基因在卵子发生过程中的表达规律及其在卵母细胞发生、发育和成熟中的作用,建立了家畜卵母细胞体外发生的技术体系;攻克山羊腔前卵泡卵母细胞体外成熟难关,在世界上首次将山羊腔前卵泡卵母细胞体外培养至成熟,并获得卵裂胚。(6)系统研究和阐明了山羊卵母细胞发生,胚胎发生和发育,胎儿各组织、系统的发生和发育规律。(7)揭示了山羊胚胎性基因启动转录的时间,山羊早期胚胎基因调控过渡时期的基因复制和表达规律,山羊早期胚胎的细胞极化和致密化规律及其囊胚形成的分子调控机理,从理论上系统阐明了通过细胞核移植实现山羊胚胎克隆化的可行性。1990年获得世界首批胚胎克隆山羊。(8)阐明和解决了山羊卵母细胞激活、克隆胚核质互作、MPF活性消涨与克隆胚DNA复制和转录、广泛性受体胞质选择等一系列胚胎克隆的理论和技术问题,建立了一整套家畜胚胎克隆技术,获得世界首批G1、G2、G3、G4和G5代胚胎克隆山羊(共45只)和世界首例体外传代的滋养层细胞克隆山羊。形成目前世界上最大的胚胎克隆羊群体。(9)1997年,获得我国首例冷冻胚胎克隆牛犊,其克隆胚的体外发育率达到国际先进水平。上述实验结果揭示出下列发育生物学的理论问题:A.哺乳动物附植前的胚胎卵裂球,囊胚内细胞团和滋养层细胞的核均具可塑性,其发育功能在一定条件下可以发生逆转,与去核卵母细胞一起可重组具有全能性发育能力的克隆胚;B.克隆胚的发育能力并不受胚胎性基因启动转录和卵源性RNA消失的影响;C.在卵母细胞质的诱导下,被移入的细胞核基因的表达程序发生重排或部分重排,克隆胚的发育能力受细胞核基因表达程序重排程度的影响。上述理论发现,为人们深刻认识核质互作机理及在体外条件下调节克隆胚的发育能力,创造高效的胚胎克隆程序奠定了基础。(10)系统研究了山羊和牛不同类型体细胞的发育潜能和可塑性,攻克体细胞体外传代、去分化诱导、核质相互协调处理等关键技术,建立了体细胞克隆家畜技术体系,获得牛和山羊体细胞克隆的囊胚和山羊体细胞克隆胚怀孕受体并于2000年6月16日12时58分获得世界首例体细胞克隆山羊羔一只。(11)用大熊猫皮肤成纤维细胞与山羊去核卵母细胞组建大熊猫克隆胚获得成功,大熊猫体细胞克隆胚的体外囊胚发育率达到18%左右。这标志着大熊猫体细胞克隆胚已顺利地完成了体外发育阶段。(12)由他主持完成的“山羊胚胎分割和同卵双生试验”,在国内首先建立了家禽胚始分割的方法,获得首批家禽同卵双生后代。他主持完成的“小鼠山羊半胚冷冻和冻胚分割试验”建立了简便快速、高效的半胚冷冻和冻胚分割程序,获得不同日龄的同卵双生山羊羔和山羊冻胚分割的同卵双生后代,其成功率达到国际领先水平。

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