时光穿梭地鱼
穿梭载体(shuttle vector)是指含有两个亲缘关系不同的复制子,能在两种不同的生物中复制的。例如既能在原核生物中复制,又能在真核生物中复制的载体。这类载体不仅具有细菌质粒的复制原点及选择标记基因,还有真核生物的自主复制序列(ARS)以及选择标记性状,具有多克隆位点。通常穿梭载体在细菌中用于克隆,扩增克隆的基因,在酵母菌中用于基因表达分析。
yiranrenxiaoyao
中间质粒名字,pBR322是常用的一种,都是改造过可以查的Apr和Tetr是抗氨苄和抗四环素ROP应该是控制拷贝数ROI是合成生长素的两个基因还有一个origin of replication复制起始位点其余的都是酶切位点
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具体如下:
图谱中的ori表示质粒的复制起点。质粒的复制起点决定了质粒的宿主及质粒的拷贝数相关,它是质粒中的一段特定序列,富含AT和重复序列。
图谱中的AmpR、KanaR等表示质粒载体中的筛选标签,多为抗生素抗性基因,方便后续通过抗生素筛选阳性克隆。特点是单词最后会以大写R或上标r结束。
图谱中的MCS或者许多内切酶排排坐的部分,就是质粒的多克隆位点。多克隆位点为一系列限制性内切酶酶切位点,是外源DNA的插入位点,一般可通过酶切/连接的方式将外源DNA插入质粒。
相关信息:
质粒载体中除复制起始位点、筛选标记、多克隆位点外,还具有其他一些表达或调控元件,如转录调控元件、翻译调控元件和融合表达标签蛋白等。
蛋白纯化标签蛋白:His-Tag,GST-tag等。
蛋白检测标签蛋白:Myc-Tag,Flag-Tag,HA-Taq等。
荧光蛋白表达标签:GFP,mCherry等。
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