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山寨天后
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哼哼家的猫猫

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这是因为DNA复制量未达到仪器检测到的水平,但实际PCR循环却真实进行,反映在仪器曲线上为基线,直到量变达到质变时,才会被仪器检测到,变成指数增长期。

一般把荧光PCR的前15个循环信号作为荧光本底信号(baseline,基线期),即样本的荧光背景值和阴性对照的荧光值,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖。

荧光阈值是在荧光扩增曲线上人为设定的一个值,它可以设定在荧光信号指数扩增阶段任意位置上,荧光域值的缺省设置是3~15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍(机器自动设置)。

在做荧光定量PCR实验时,经常采用手动设置,手动设置的原则要大于样本的荧光背景值和阴性对照的荧光最高值,同时要尽量选择进入指数期的最初阶段,真正的信号是荧光信号超过域值。

扩展资料:

PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号,荧光阈值的(默认)设置是3-15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍,即:threshold = 10*SDcycle 3-15

Ct值与起始模板的关系

每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系,公式如下。

Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX0+lgN/lg(1+Ex)

n为扩增反应的循环次数,X0为初始模板量,Ex为扩增效率,N为荧光扩增信号达到阈值强度时扩增产物的量。

参考资料来源:百度百科-循环阈值

循环阈值英文

197 评论(8)

不一样@016

可以根据Ct值的大小估计模板的初始量。CT值,也称循环阈值,C代表Cycle,t代表threshold。其含义是,在PCR循环过程中,荧光信号开始由本底进入指数增长阶段的拐点所对应的循环次数。Cq值的定义,实时荧光定量PCR是将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规律,与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中,在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度,求得Ct值,同时利用数个已知模板浓度的标准品作对照,即可得出待测标本目的基因的拷贝数。是测定人体某一局部组织或器官密度大小的一种计量单位,通常称亨氏单位(hounsfieldunit,HU)空气为-1000,致密骨为+

192 评论(8)

梧桐春雨

关于pcr扩增过程中ct值的说法哪个是错误的

244 评论(9)

好想你chen

下列关于Ct值的叙述,错误的是A、是扩增曲线与荧光本底基线的交叉点处相应的反应循环数B、可以根据Ct值的大小估计模板的初始量C、Ct值大小与模板量呈正比,Ct值越大,模板量越多D、是定量PCR外参照系统中重要的参数E、Ct值大小与模板量呈反比,Ct值越小,模板量越多正确答案:C

266 评论(15)

L张小猛

阈值( [yù zhí],英语是:threshold value。

140 评论(14)

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